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兔子白介素10檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)時(shí)有哪些技巧呢?

發(fā)布時(shí)間: 2022-09-26  點(diǎn)擊次數(shù): 1010次
  兔子白介素10檢測(cè)試劑盒主要由活化的CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞產(chǎn)生的具有廣泛生物活性的細(xì)胞因子。是所有T細(xì)胞亞群的生長(zhǎng)因子,并可促進(jìn)活化B細(xì)胞增殖,故為調(diào)控免疫應(yīng)答的重要因子,也參與抗體反應(yīng)、造血和腫瘤監(jiān)視。21世紀(jì)初人類開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃對(duì)于白介素2的研究取得了突破性的進(jìn)展。
  兔子白介素10檢測(cè)試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人白介素6(IL-6)水平。用純化的人白介素6(IL-6)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介素6(IL-6),再與HRP標(biāo)記的白介素6(IL-6)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素6(IL-6)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人白介素6(IL-6)濃度。
  兔子白介素10檢測(cè)試劑盒在使用時(shí)的技巧:
  1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
  2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
  3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間醉好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,醉好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第—孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)醉后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
  5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  6、底物請(qǐng)避光保存。
  7、嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
  8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
  9、本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
  10、如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
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